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产人胃蛋白酶原的酵母工程菌及其制备方法和应用.pdf

摘要
申请专利号:

CN200710094018.2

申请日:

2007.08.14

公开号:

CN101144061A

公开日:

2008.03.19

当前法律状态:

终止

有效性:

无权

法?#19978;?#24773;: 登录超时
IPC分类号: C12N1/19; C12N15/57; A61K38/48; A61P1/04; C12R1/84(2006.01)N 主分类号: C12N1/19
申请人: 上海华冠生物?#37202;?#26377;限公司; 复旦大学
发明人: 徐晓晶; 宋大新; 金维荣
地址: 201203上海市浦东新区张江李冰路151号
优?#28909;ǎ?/td>
专利代理机构: 上海浦一知识产权代理有限公司 代理人: 陈履忠
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法律状态
申请(专利)号:

CN200710094018.2

授权公告号:

法律状态公告日:

2018.12.02

法律状态类型:

登录超时

摘要

本发明公开了一种产人胃蛋白酶原的酵母工程菌,该酵母工程菌是由重组表达载体转化的酵母菌,该重组表达载体包含人胃蛋白酶原基因。本发明还公开了该酵母工程菌的制备方法和应用。本发明的酵母工程菌,实现了人胃蛋白酶原C在毕赤氏?#29366;?#37237;母中高效?#32622;?#34920;达,其表达量在600mg/L以上,且本发明的重组PGC与人胃组织提取的PGC在免疫原性和蛋白酶活性上都保持一致,可广泛应用于医药、食品、化工等众多领域,具有非常好的应用价值和市场前景。

权利要求书

权利要求书
1.  一种产人胃蛋白酶原的酵母工程菌,其特征在于,该酵母工程菌是由重组表达载体转化的酵母菌,该重组表达载体包含人胃蛋白酶原基因。

2.  如权利要求1所述的酵母工程菌,其特征在于,所述酵母菌为毕赤氏?#29366;?#37237;母菌。

3.  如权利要求1所述的酵母工程菌,其特征在于,所述表达载体为毕赤氏?#29366;?#37237;母的?#32622;?#24615;表达载体。

4.  如权利要求1至3中任一项所述的酵母工程菌,其特征在于,所述人胃蛋白酶原基因为人胃蛋白酶原C基因。

5.  如权利要求4所述的酵母工程菌,其特征在于,所述酵母工程菌为毕赤氏?#29366;?#37237;母(Picchia pastoris)GS115,保藏号为:CGMCC NO.2123。

6.  一种权利要求1所述酵母工程菌的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将获得的人胃蛋白酶原基因装入表达载体,以构成重组表达载体;
(2)将步骤(1)的重组表达载体转化入酵母宿主细胞,获得人胃蛋白酶原基因转化的酵母工程菌。

7.  如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)之后,还包括:将酵母工程菌进行抗性筛选和诱导表达。

8.  一种生产人胃蛋白酶原的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)在适合生长的条件下,发酵培养权利要求1所述的酵母工程菌;
(2)?#20248;?#20859;基中分离出人胃蛋白酶原。

9.  权利要求1所述的酵母工程菌生产的人胃蛋白酶原在制备助消化药和人胃蛋白酶产?#20998;?#30340;应用。

10.  权利要求1所述的酵母工程菌生产的人胃蛋白酶原在胃疾病诊断和防治中的应用。

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胃蛋白酶 酵母 工程 及其 制备 方法 应用
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